Minimnya penggunaan benih kentang hasil in vitro oleh petani dikarenakan harga benih awal yang mahal sehingga akan menambah biaya produksi. Salah satu cara yang dapat dilakukan untuk menekan harga benih kentang berkualitas adalah dengan mengurangi biaya produksi benih di tahap in vitro seperti penggunaan wadah dalam volume yang besar, mengurangi penggunaan agar pemadat dan konsentrasi gula pasir dan memanfaatkan hormon alami. Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan untuk memperoleh sistem kultur dan konsentrasi gula pasir yang optimum, serta interaksi antara keduanya dalam multiplikasi eksplan kentang kultivar Granola. Rancangan percobaan yang digunakan adalah rancangan acak lengkap faktorial. Faktor pertama berupa sistem kultur (pemberian aerasi dengan bioreaktor dan tanpa aerasi). Faktor kedua berupa konsentrasi gula pasir (0 g/l, 7,5 g/l dan 15 g/l). Hasil penelitian menunjukkan sistem kultur aerasi memiliki rata-rata tertinggi pada parameter jumlah tunas, jumlah nodus, tinggi planlet, jumlah akar primer dan jumlah daun berganda. Pada konsentrasi gula pasir 7,5 g/l menghasilkan rata-rata tertinggi pada parameter jumlah nodus, jumlah tunas dan jumlah daun berganda. Konsentrasi gula pasir 15 g/l menghasilkan rata-rata tertinggi pada tinggi planlet dan jumlah akar primer. Hiperhidrisitas pada planlet ditemukan pada perlakuan sistem aerasi dan sistem non aerasi dengan konsentrasi gula pasir 0 g/l. Persentase daya hidup planlet saat aklimatisasi tertinggi terdapat pada perlakuan non aerasi dengan konsentrasi gula pasir 7,5 g/l sebesar 100%. Sistem kultur yang optimal dalam multiplikasi tunas kentang adalah sistem aerasi. Konsentrasi gula pasir yang optimal dalam multiplikasi tunas kentang adalah 7,5 g/l. Interaksi perlakuan sistem kultur dan konsentrasi gula pasir tidak berpengaruh terhadap seluruh parameter. Kata kunci : Kultivar granola;Multiplikasi;Sistem kultur