Perakitan varietas baru dapat dilakukan dengan berbagai metode dalam pemuliaan tanaman, salah satunya yaitu dengan induksi mutasi menggunakan iradiasi sinar gamma. Pada generasi M1, penentuan radiosensitivitas tanaman penting dilakukan. Radiosensitivitas dapat diketahui dari respon morfologi tanaman terhadap perlakuan iradiasi serta nilai LD50 (Lethal Dose, 50%) pada tanaman yang diradiasi. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan nilai LD50 dan menganalisis keragaan karakter agronomi mutan padi varietas Mira-1 dan Bestari generasi M1. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 2 faktor, faktor pertama adalah varietas padi, yaitu Mira-1 dan Bestari dan faktor kedua adalah dosis iradiasi 0 Gy-1000 Gy dengan selang dosis 100 Gy. Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai LD50 pada varietas Mira-1 dan Bestari yang dihasilkan berbeda pada kedua varietas, yaitu berkisar dari 521,40-683,68 Gy. Perlakuan iradiasi menyebabkan nilai rata-rata karakter jumlah anakan produktif, panjang malai, jumlah cabang primer dan cabang sekunder malai, jumlah gabah isi, dan persentase gabah isi menurun. Pada karakter jumlah gabah hampa, perlakuan iradiasi menyebabkan peningkatan nilai pada kedua varietas. Perlakuan iradisi sinar gamma memberikan perubahan berupa peningkatan dan penurunan nilai pada karakter agronomi yang diamati. Kata kunci : Dosis;Iradiasi;Mutasi;Padi;Sinar gamma