Biji pepaya memiliki rasa yang pahit, pedas dan beraroma menyengat sehingga biji pepaya kurang diminati untuk diolah. Biji pepaya yang banyak terbuang adalah biji pepaya varietas ‘California’ dan ‘Bangkok’. Biji pepaya dari kedua varietas tersebut belum dimanfaatkan secara optimal, tetapi biji pepaya berpotensi sebagai bahan pengawet makanan yang ikut masuk ke dalam tubuh, oleh karenanya perlu di uji toksisitasnya. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek toksisitas subakut ekstrak biji pepaya ‘California’ dan ‘Bangkok’. Penelitian ini menggunakan 28 ekor mencit putih jantan, dibagi secara acak menjadi 3 kelompok diberi ekstrak ‘California’, 3 kelompok diberi ekstrak ‘Bangkok’ dan 1 kelompok diberi pelarut CMC 1% secara gavage dengan konsentrasi 4, 6, dan 8% (b/v). Perlakuan dilakukan selama 28 hari dan pada hari ke-29 darah mencit diambil melalui vena jungularis untuk diuji SGPT, SGOT serum, dan pembedahan untuk pengamatan organ viseral mencit secara makroskopis. Selama penyuntikkan mencit ditimbang berat badan dan diamati kondisi fisiknya. Hasil uji toksisitas subakut selama 28 hari dengan pemberian ekstrak tersebut tidak berpengaruh pada berat badan, kondisi fisik, dan organ viseral mencit. Namun pada data SGPT dan SGOT menunjukkan peningkatan pada semua kelompok perlakuan jika dibandingkan dengan kelompok kontrol, tetapi peningkatan tersebut masih dibawah ambang batas normal sehingga aman untuk pengawet makanan.
Kata kunci: Biji pepaya ‘California’; biji pepaya ‘Bangkok’; Toksisitas Subakut; SGPT; SGOT