Penyakit ikan merupakan masalah penting bagi pengembangan budidaya perikanan, terutama ikan nila. Vaksin menjadi solusi pengelolaan kesehatan ikan yang efektif namun harus memiliki standar keamanan Quality-Safety-Eficacy (QSE). Tujuan penelitian ini adalah untuk menganalisis kemanan vaksin koktail Aeromonas hydrophilla dan Streptococcus agalactiae dengan merendamnya pada benih ikan nila. Penelitian ini menggunakan metode eksperimental dengan model Rancangan Acak Lengkap (RAL). Data diambil dari tiga perlakuan komposisi media yang berbeda. Perlakuan A direndam vaksin koktail, perlakuan B dengan direndam larutan PBS, dan perlakuan C sebagai kontrol negatif tanpa perlakuan. Setiap perlakuan diulang sebanyak tiga kali.SR ikan nila tertinggi pada ikan tidak diberi perlakuan 99% kemudian diikuti perlakuan vaksin 88,9%, dan terakhir oleh perlakuan PBS 82,3%. Laju pertumbuhan berat mutlak memperlihatkan hasil terbaik pada perlakuan PBS dan vaksin dengan nilai 18,9. data histopatologi menunjukkan tidak terdapat perbedaan signifikan terhadap abnormalitas yang terjadi pada organ uji antara kelompok kontrol dan keamanan pada awal dan akhir pengujian.
Kata kunci : vaksin koktail: ikan nila; keamanan; Aeromonas hydrophilla; Streptococcus agalactiae