Fraksinasi dan karakterisasi senyawa aktif antioksidan dari ekstrak air bunga kecombrang (Etlingera elatior) telah dilakukan. Ekstraksi dilakukan dengan cara refluks, fraksinasi dengan KLT, uji antioksidan menggunakan KLT autografi serta metode DPPH dan karakterisasi menggunakan UV-Vis, FTIR dan LCMS. Hasil kromatografi lapis tipis (KLT) dengan fase gerak dietil eter:etil asetat (3:1) diperoleh 2 fraksi dengan masing-masing Rf sebesar 0,32 dan 0,566. Kedua fraksi KLT tersebut positif terhadap uji aktivitas antioksidan KLT autografi. Pengujian aktivitas antioksidan metode DPPH menunjukkan kedua fraksi memiliki sifat antioksidan sangat lemah namun fraksi 2 (IC50 = 369.99 ± 45.97 ppm) memiliki aktivitas antioksidan yang lebih tinggi dibandingkan dengan fraksi 1 (IC50 = 545.89 ± 26.71 ppm ). Senyawa pada fraksi 2 memberikan λmax pada 206 nm transisi elektron π→π* dan mengandung gugus fungsi –OH (3369,49 cm-1), C-H (2975,24cm-1), C-O (1048,84 cm-1), =C-H (1454,91 cm-1 dan 1382,03 cm-1) dan C=C (1651,06 cm-1). Hasil LCMS senyawa fraksi 2 diperoleh beberapa peak dengan 3 peak utama yaitu dengan BM 868 g/mol, 477 g/mol dan 428 g/mol.
Kata Kunci : Kecombrang (Etlingera elatior), Fraksinasi, Karakterisasi, Antioksidan, DPPH, KLT Autografi.