Pengujian kehalalan produk pangan hewani perlu dilakukan terutama untuk produk pangan yang kritis seperti produk olahan daging. Beberapa produk olahan masih ditemukan cemaran daging babi dalam proses pengolahannya. Penelitian ini dilakukan untuk menentukan validitas metode analisis cemaran daging babi pada produk olahan daging (sosis sapi dan kambing) berdasarkan profil protein hasil uji SDS-PAGE yang dilanjutkan dengan analisis densitometri. Sampel yang digunakan yaitu sosis sapi, sosis babi komersil, sosis kambing dan sosis babi kontrol positif buatan sendiri. Sosis komersil dibeli dari supermarket di wilayah Tangerang Selatan. Sampel diekstraksi proteinnya dengan homogenizer dalam buffer PBS pH 7,2. Ekstrak protein diuji kadar protein terlarutnya dan dipisahkan dengan SDS-PAGE (sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis). Hasil pemisahan protein dianalisis densitometri (Image J) dan ditentukan kandidat protein biomarkernya untuk dilanjutkan ke tahap validasi. Validasi metode meliputi uji presisi, uji akurasi, uji linearitas, serta uji ketangguhan metode. Hasil analisis SDS-PAGE diperoleh kandidat protein biomarker dengan bobot molekul 32 kDa dan 22 kDa. Hasil validasi metode menunjukkan nilai presisi KV < 5% dan % recovery > 95%. Hasil uji linearitas diperoleh nilai (r2) = 0,9759 (protein 1) dan 0,9604 (protein 2). Hasil analisis ketangguhan metode menunjukkan faktor perubahan pH mempengaruhi hasil intensitas pita profil protein.
Kata Kunci: cemaran babi, densitometri, sosis, SDS-PAGE, validasi metode.