Bumi mengalami peningkatan suhu yang mengakibatkan cekaman panas. Sapi Bali, Madura, dan Peranakan Ongole memiliki kemampuan adaptasi yang baik dengan peran bakteri di dalam rumen dapat menjaga homeostasis ternak. Tujuan penelitian ini adalah mengidentifikasi profil bakteri dan metabolisme fungsional rumen yang berperan dalam adaptasi terhadap cekaman panas. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan sapi Bali (B), Madura (M), dan Peranakan Ongole (PO), masing-masing 3 ulangan. Profil bakteri dianalisis dengan Next Generation Sequencing (NGS), CowPi, dan Analysis of Variance (ANOVA). Suhu lingkungan 32-33°C menghasilkan Temperature Humidity Indeks (THI) bernilai 78-85°C yang mengindikasikan stres pada ketiga sapi dan menghasilkan suhu tubuh 39°C, respirasi 39-52 kali/menit, dan denyut jantung 75-89 kali/menit. Hasil profil bakteri rumen berbeda nyata (p