Makrozoobentos adalah biota perairan yang hidup melekat di substrat dasar perairan. Keberadaan makrozoobentos sangat dipengaruhi faktor biotik dan abiotik lingkungan perairan sehingga dapat digunakan sebagai bioindikator status ekosistem perairan. Penelitian bertujuan untuk mengetahui struktur komunitas makrozoobentos, hubungannya dengan faktor fisik kimia perairan, dan status ekosistem perairan Situ Asih Pulo, Depok, Jawa Barat berdasarkan komunitas makrozoobentos. Titik sampling terdiri dari 5 stasiun dengan 3 pengulangan. Analisis data dilakukan dengan indeks keanekaragaman jenis (H'), kemerataan jenis (E), dominansi jenis (D), Family Biotic Index (FBI), dan Principal Component Analysis (PCA). Hasil pengukuran faktor fisik kimia perairan Situ Asih Pulo, yaitu: suhu 29,2 – 31,4 °C; pH 6,2 – 7,1; DO 6,4 – 7,4 mg/L; TDS 63 – 88 ppm; EC 126 – 181 μS/cm; dan kecerahan 21 – 66 cm. Faktor suhu, pH, TDS, EC memenuhi baku mutu air danau kelas 2, sedangkan faktor kecerahan tidak memenuhi baku mutu. Hasil penelitian diperoleh 7 jenis makrozoobentos yang terbagi atas 4 kelas, yaitu Clitellata, Gastropoda, Insecta, dan Malacostraca. Indeks H' termasuk kategori rendah hingga sedang yaitu 0,93 – 1,47, indeks E cukup merata dengan kisaran 0,79 – 0,91, serta indeks D termasuk kategori rendah hingga sedang yaitu berkisar antara 0,25 – 0,45. Hasil PCA menunjukkan bahwa faktor TDS, EC, pH, DO, dan suhu berpengaruh terhadap komunitas makrozoobentos Situ Asih Pulo. Nilai FBI 7,88 menunjukkan bahwa status ekosistem perairan Situ Asih Pulo tercemar organik sangat berat. Famili yang bersifat sangat toleran dan invasif yaitu Ampullariidae, Chironomidae, dan Tubificidae ditemukan melimpah di perairan Situ Asih Pulo. Kata kunci: indeks biotik famili;makrozoobentos;situ asih pulo;TDS